固定相是色譜柱內(nèi)不移動(dòng)的活性物質(zhì)稱(chēng)為固定相,是色譜分析中的關(guān)鍵,混合組分的分離,主要取決于固定相的選擇。

固定相是色譜柱內(nèi)不移動(dòng)的活性物質(zhì)稱(chēng)為固定相,是色譜分析中的關(guān)鍵,混合組分的分離,主要取決于固定相的選擇。吸收色譜所用的固定相通常為具有吸附活性的物質(zhì),如硅膠、氧化鋁、活性炭等。分配色譜中的固定相是涂漬在載體表面上的液體。在這里,惰性物質(zhì)(載體)單純作為固定相的物理支持物,不屬于固定相的組成部分。

離子交換色譜中的固定相為離子交換劑,排阻色譜中的固定相為凝膠。

固定相的選擇

分離中等極性和極性較強(qiáng)的化合物可選擇極性鍵合相。氰基鍵合相對(duì)雙鍵異構(gòu)體或含雙鍵數(shù)不等的環(huán)狀化合物的分離有較好的選擇性。氨基鍵合相具有較強(qiáng)的氫鍵結(jié)合能力，對(duì)某些多官能團(tuán)化合物如甾體、強(qiáng)心甙等有較好的分離能力；氨基鍵合相上的氨基能與糖類(lèi)分子中的羥基產(chǎn)生選擇性相互作用，故被廣泛用于糖類(lèi)的分析，但它不能用于分離羰基化合物，如甾酮、還原糖等，因?yàn)樗鼈冎g會(huì)發(fā)生反應(yīng)生成Schiff 堿。二醇基鍵合相適用于分離有機(jī)酸、甾體和蛋白質(zhì)。

分離非極性和極性較弱的化合物可選擇非極性鍵合相。利用特殊的反相色譜技術(shù)，例如反相離子抑制技術(shù)和反相離子對(duì)色譜法等，非極性鍵合相也可用于分離離子型或可離子化的化合物。ODS(octadecyl silane)是應(yīng)用最為廣泛的非極性鍵合相，它對(duì)各種類(lèi)型的化合物都有很強(qiáng)的適應(yīng)能力。短鏈烷基鍵合相能用于極性化合物的分離，而苯基鍵合相適用于分離芳香化合物。

另外，美國(guó)藥典對(duì)色譜法規(guī)定較嚴(yán)，它規(guī)定了柱的長(zhǎng)度，色譜填料的種類(lèi)和粒度，色譜填料分類(lèi)也較詳細(xì)，這樣使色譜圖易于重現(xiàn)；而中國(guó)藥典僅規(guī)定色譜填料種類(lèi)，未規(guī)定柱的長(zhǎng)度和粒度，這使檢驗(yàn)人員難于重現(xiàn)實(shí)驗(yàn)，在某些情況下還浪費(fèi)時(shí)間和試劑。

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