本篇分享一下網(wǎng)友對色譜柱中隱藏的秘密一些看法，包括柱壓與柱效的關(guān)系、色譜柱如何比較柱效、線速度相同，分析時間與柱長成正比、在線速度相同的情況下，管徑越大需要的流速越大，消耗溶劑越多等方面。

1： 線速度S=0.1cm/s時，柱效最高，特別是對于粒徑較大的色譜柱。

根據(jù)方程式?。篐＝A＋B/u＋C uH為塔板高度(cernterm)，A、B及C為三個常數(shù)，其單位分別為cm、cm /s及s。u為載氣的線速度(cm/s)。u≈L/t , L為柱長(cm), t 為死時間(s)。VanDeernter方程式說明：在u一定時，A、B及C三個常數(shù)越小，峰越銳，柱效越高。反之，則峰擴(kuò)張，柱效低。用VanDeemter方程式可以解釋塔板高度—流速曲線。在低流速時(0～u 之間) u越小，B/u項越大，C u項越小。此時，Cu項可以忽略，B/u項起主導(dǎo)作用，u增加則H降低，柱效增高。在高流速時(u＞u )，u越大，C u越大，B/u越小。這時C u項起主導(dǎo)作用，u增加，H增加，柱效降低。

u在0.1 cm/s左右時，H有最小值，即最大的柱效。

2：最佳線速度下的最小理論踏板高度及最高柱效

式中：H——理論踏板高度。——填料粒徑。

式中：N——柱效。L——柱長。

推導(dǎo)出公式：式中N——理論塔板數(shù)。L——柱長um。——填料粒徑um

例如：150mm*3.9mm  4um 色譜柱的最佳柱效=150000/2.48*4=15120（理論塔板數(shù)）

1米長粒徑為3um色譜柱， 1米柱長的柱效=1000000/2.48*3=134408.6（理論踏板數(shù)）

高效液相色譜柱理論塔板數(shù)歸納：

3：最佳線速度下的最佳流速

對于不同粒徑的色譜柱，特別是大粒徑色譜柱（粒徑大于3um）線速度u=0.1cm/s時，對應(yīng)的流動相的流速F為最佳流速。

根據(jù)公式式中：

線速度u：cm/s，流速F：ml/min，色譜柱柱徑D：mm。色譜柱柱徑D=4.6 mm的柱子，當(dāng)線速度u=0.1 cm/s時，最佳流速F=1ml/min色譜柱柱徑D=4.0mm的柱子。當(dāng)線速度u=0.1cm/s時。最佳流速F≈0.8ml/ming

4：在線速度相同的情況下，管徑越大需要的流速越大，消耗溶劑越多。

使用小管徑色譜柱可以節(jié)約溶劑。

由公式得消耗溶劑只差 

例如：當(dāng)線速度u=0.1cm/s時，使用管徑D=2.1mm.的色譜柱比使用D=4.6mm的色譜柱，節(jié)約溶劑79%。

所以，方法優(yōu)化時使用小管徑色譜柱既有利于節(jié)約溶劑和減小載樣量。

5：線速度相同，分析時間與柱長成正比

式中：u——線速度，L——柱長，t——分析時間，

A：線速度U相同【流速F相同，管徑D相同】，柱效N不同【柱長L不同，粒徑d不同】，洗脫液，柱溫，進(jìn)樣量相同結(jié)論：分析時間t不同，分離度R不同，分析時間t與柱長L成正比。

B：線速度U相同【流速F不同，管徑D不同】，柱效N相同【柱長L相同，粒徑d相同】，洗脫液，柱溫相同。結(jié)論：分析時間t相同，分離度R相同，進(jìn)樣量與柱容量成正比。

C：柱容量公式式中：r——柱半徑cm，L——柱長cm，60%——柱空穴率。

6：色譜柱如何比較柱效

式中：N——柱效，L——色譜柱長，——粒徑對于同種填料不同管徑的色譜柱，柱效N與柱長L成正比，與粒徑成反比，柱長L與粒徑之比相同的色譜柱柱效N相同，在方法優(yōu)化的時候小粒徑短柱和比值相同的大粒徑長柱有著同樣的柱效。7：色譜柱柱前壓

 

如果填料顆粒大小減半，則理論塔板數(shù)加倍（假設(shè)柱長不變）。如果填料顆粒大小減半，則柱壓增加為原來的四倍。 如果柱長加倍，則理論塔板數(shù)加倍。如果柱長加倍，則分析時間加倍。隨著柱長增加，柱壓也線性地增加。減小粒徑和柱徑，減小擴(kuò)散增加柱效，同時減小流速和柱長，降低柱壓，以便于適應(yīng)色譜系統(tǒng)，由于色譜柱管徑的縮小，粒徑的減小也會對系統(tǒng)帶來不利的影響，在分析允許的條件下，升高柱溫，降低流動相的粘度，以緩解系統(tǒng)壓力,提高流動相的流量，縮短分析時間。

8：柱壓與柱效的關(guān)系

由公式一：柱壓公式 

公式 二：最高柱效公式

公式三：最佳線速度公式 

可以導(dǎo)出柱壓與柱效的公式式中：：柱壓。：單位轉(zhuǎn)換系數(shù)。η：流動相粘度。u：最佳線速度。N：色譜柱柱效。：色譜柱填料粒徑。由上述公式可以看出：在最佳線速度下，色譜柱的壓力與流動相的粘度成正比，與柱效成正比，與色譜柱的粒徑成反比。 

總結(jié)：上述無論是最佳流速，最高柱效還是最佳溶劑消耗以及最佳分析時間（分離度）都是在最佳線速度的基礎(chǔ)上的，包括柱壓與柱效以及與粒徑之間的關(guān)系也是在最佳線速度（最高柱效）的情況下定義的，離開了最佳線速度將毫無意義。

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